Научный архив: статьи

Цель. Определение молекулярно-биологических характеристик штаммов Candida albicans, выделенных при рецидивирующем вульвовагинальном кандидозе (РВВК), ассоциированных с формированием резистентности к препаратам азолового ряда.

Материалы и методы. В исследование было включено 36 клинических изолятов C. albicans от больных РВВК, обратившихся в НИИ медицинской микологии им. П. Н. Кашкина за амбулаторной помощью с июля по ноябрь 2024 г. Видовую идентификацию Candida spp. проводили методами MALDI-TOF масс-спектрометрии и таргетного секвенирования. Чувствительность Candida spp. к противогрибковым лекарственным средствам (ПГЛС) определяли с помощью тест системы Fungus AST (Autobio Diagnostics Co, Китай) с интерпретацией пороговых значений МПК в соответствии с CLSI M27A, 2022. Нуклеотидную последовательность гена ERG11 изучали методом таргетного секвенирования на генетическом анализаторе ABI PRISM 3500. Уровень экспрессии генов белков-транспортеров лекарственных препаратов CDR1, CDR2, MDR1 и FLU1 анализировали в ходе ПЦР-РВ с использованием флуоресцентного красителя EVA Green методом относительных измерений 2-ΔΔСt. Биопленкообразование штаммов C. albicans оценивали по общей клеточной массе (окрашивание водным раствором кристаллического фиолетового) и метаболической активности клеток (метод восстановления солей тетразолия). Статистическую обработку результатов проводили с использованием непараметрических критериев оценки программы SPSS v.22.0.

Результаты. 11 (30,5%) штаммов были чувствительны к флуконазолу, 6 (14,0%) – отнесены к категории «чувствительный дозо-зависимый», 20 (55,5%) – резистентны к данному ПГЛС. Все штаммы были чувствительны к полиенам, эхинокандинам и 5-флуцитозину. В работе показана корреляция между нуклеотидным полиморфизмом гена ERG11 и чувствительностью штамма к флуконазолу. Резистентные штаммы C. albicans (МПК >8 мг/л) отличались наименьшей вариабельностью и наличием в генотипе единственной миссенс-мутации T394C (Y132H), ассоциированной с устойчивостью к азолам. Предположена возможная роль A1343G (E448G), как супрессорной внутригенной мутации, нивелирующей влияние T394C (Y132H) на конформационные изменения белка Erg11. В данном аспекте необходимы дальнейшие исследования. Для генов ERG11 и FLU1 показан повышенный уровень экспрессии (р = 0,004 и р = 0,012 соответственно) у нечувствительных к флуконазолу штаммов C. albicans по сравнению с чувствительными. Статистически значимых различий в экспрессии генов белков-транспортеров лекарственных препаратов CDR1, CDR2 и MDR1 не установлено. Все изученные штаммы C. albicans образовывали биопленки in vitro. Штаммы, резистентные к флуконазолу, обладали большей метаболической активностью и клеточной массой биопленки (p = 0,011 и р = 0,012 соответственно).

Выводы. Резистентность возбудителей РВВК в Северо-Западном регионе России ассоциирована с повышенным биопленкообразованием, аминокислотной заменой Y132H и повышенным уровнем экспрессии генов ERG11 и FLU1.

Гнойно-септические послеродовые осложнения занимают третье место в структуре материнской смертности. В этиологии послеродового эндометрита основную роль играют условно-патогенная микрофлора, в том числе ассоциации микроорганизмов, а также наличие в анамнезе хронической урогенитальной инфекции, бактериального вагиноза, инфекций, передаваемых половым путем. Несмотря на многочисленные исследования, вопрос о том, какие микроорганизмы, колонизирующие родовые пути, являются потенциально опасными в отношении развития инфекционно-воспалительной патологии послеродового периода, до сих пор остается предметом обсуждения.

Цель — изучить этиологию и выявить особенности клинического течения послеродового эндометрита у родильниц с факторами риска развития гнойно-септических осложнений.

Материалы и методы исследования. В Перинатальном центре НМИЦ им. В.А. А лмазова проведено ретроспективное сравнительное исследование. Родильницы были разделены на две группы: основную — родильницы с развившимся послеродовым эндометритом (n = 72) и сравнения — родильницы с физиологическим течением послеродового периода (n = 127). Бактериологическое исследование лохий проводили на третьи сутки послеродового периода, а также при развитии клинической картины послеродового эндометрита до назначения эмпирической антибактериальной терапии.

Результаты исследования. При бактериологическом исследовании лохий в основной группе пациентов выделение микроорганизмов наблюдали у 68 % родильниц. У 32 % родильниц при неоднократных посевах лохий возбудителя эндометрита выявить не удалось. В группе сравнения доля выделенных микроорганизмов при бактериологическом исследовании лохий составила 15 % (p < 0,005). В период беременности в основной группе
родильниц выделение микроорганизмов из цервикального канала отмечено в 26,4 % случаев, в группе сравнения — в 7 % случаев (p < 0,005). Несмотря на отсутствие клинической симптоматики, всем пациенткам проводили системную антибактериальную терапию. У 90 % родильниц основной группы при развитии эндометрита эмпирическая терапия оказалась неэффективной вследствие антибиотикорезистентности микрофлоры. При анализе видового состава микроорганизмов, выделенных при бактериологическом исследовании лохий, у пациенток основной группы чаще обнаружены представители кишечной микрофлоры — Escherichia coli (40 % родильниц основной группы и 2,4 % родильниц группы сравнения) и Enterococcus faecalis (25 и 4,7 % родильниц
соответственно) — в виде монокультуры. У 10 % родильниц с тяжелыми гнойно-септическими осложнениями (сепсис, параметрит, пельвиоперитонит) состав микрофлоры в лохиях не отличался от такового у родильниц с эндометритом без тяжелых гнойно-септических осложнений, а микробные ассоциации выявлены только в двух случаях.

Заключение. Этиологическая причина послеродового эндометрита у родильниц с факторами риска развития гнойно-септических осложнений — бактерии кишечной группы (Escherichia coli, Enterococcus faecalis), чаще выявляемые в виде монокультуры. Видовой состав микроорганизмов, связанных с тяжелыми формами послеродовых гнойно-септических осложнений, принципиально не отличается от возбудителей неосложненных форм послеродовой инфекции. Необоснованная антибактериальная терапия в период беременности ассоциирована с антибиотикорезистентностью микроорганизмов, вызывающих послеродовой эндометрит, что создает значительные трудности в подборе антибактериальных препаратов для его лечения.